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高效液相色譜系統(tǒng)的清潔,從哪些地方入手?

更新時間:2022-03-22        閱讀:2147
高效液相色譜使用過程中,經(jīng)常會遇到一些操作及維護問題,為使HPLC系統(tǒng)良好運行,其中一個很重要的事情就是保持系統(tǒng)的清潔。因此,應關(guān)注流動相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,對于這些地方經(jīng)常性的沖洗。

 

1、流動相儲液瓶

首先要經(jīng)常清洗流動相儲液瓶,或者每做一批新樣品更換一次流動相。一個臟的儲液瓶將會污染注入的流動相。建議儲液瓶中緩沖液使用時間不要超過一周,而有機溶劑使用時間不要超過一個月。也有人建議儲液瓶中保持用溶劑充滿,直到更換分析方法儲液瓶需更換新溶劑(流動相組成發(fā)生變化)時,將舊溶劑倒掉更換新溶劑,這樣勝于將溶劑用完。但這對于分析樣品量少的實驗室而言似乎有些浪費。儀器公司的工程師建議儲水瓶的水要天天換,每周瓶子還應該用異丙醇清洗一次。有的實驗室則在水里加入0.1~1 mM的甲酸抑制微生物的生長。這些做法看起來有些繁瑣,但卻能起到“磨刀不誤砍柴工”作用。


2、泵

接下來要沖洗的是泵。千萬不要一分析完沖幾分鐘后就停泵,特別是當流動相中含有難揮發(fā)的緩沖液(如磷酸鹽)時。如果儀器不是連續(xù)使用,當流動相蒸發(fā)時,難揮發(fā)物就會粘在活塞密封墊的表面,難揮發(fā)物將形成固形物沉淀。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。所以,無論使用長短,在停泵以前一定要用非緩沖液流動相沖洗泵在半個小時以上,要是流動相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時間應該更長些。


3、自動進樣器

自動進樣器也要按規(guī)定清洗?,F(xiàn)在的儀器多配有自動進樣器的沖洗液瓶,通常只要注意及時更換、補充沖洗液即可。自動進樣器用的洗滌液也要采用與流動相相同的方式處理,并根據(jù)溶劑的有效期和規(guī)定,清洗儲液瓶或更換洗滌液?,F(xiàn)在的自動進樣器設置、操作都很簡單,如果時間允許(特別是利用夜間運行),每次分析完后設置進1、2針純?nèi)軇ㄈ缂状肌⒁译妫?,也是一個好做法。


4、色譜柱

對柱子的污染是隨使用時間而增加。通常表現(xiàn)是:運行走基線時在記錄的色譜圖中基線噪音增加,泵壓也增加。解決這個問題的有效方法就是在每一批樣品分析結(jié)束后或準備卸下柱子時用大量的流動相沖洗柱子(例如,甲醇、乙腈和水)。用梯度沖洗效果更好,具體的比例要根據(jù)柱子的說明書和性質(zhì)而定。


5、檢測器

如果是正常使用,檢測器將依據(jù)其性質(zhì)并按照說明書規(guī)定進行洗。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器,在對柱子和系統(tǒng)進行沖洗時也就一同對檢測器流通池中污染物進行了清洗。但是蒸發(fā)光檢測器或質(zhì)譜儀則需要按照說明書進行定期清洗。這些檢測器在使用時會有難揮發(fā)污染物沉積,如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細管、錐孔板、預四極等部件,因而需要定期清洗。而且對連有這些檢測器的系統(tǒng)沖洗時,最好與這些檢測器斷開,以減少對檢測器的污染。


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